應(yīng)《非洲豬瘟病毒在飼料、墊料和機械媒介中的生存及其在病毒傳播中的潛在作用》（GP/EFSA/ALPHA/2021/09）的要求，選擇相關(guān)飼料和墊料進行穩(wěn)定性實驗。所有基質(zhì)都被ASFV污染，并在5種不同的環(huán)境條件（-20℃、4℃、10℃、20℃和37℃）下保存長達9個月。使用實時PCR和病毒分離技術(shù)在不同時間點對重復(fù)樣本進行評估。此外，對三種類型的吸血節(jié)肢動物的可能作用進行了評估。

詳細研究了代表性節(jié)肢動物在以感染性血液為食后，病毒基因組和感染性病毒在體內(nèi)潛伏的時間。最后一步，獲得了進一步的概念驗證數(shù)據(jù)，證明節(jié)肢動物通過攝入被ASFV污染的血液而傳播。總之，傳染性病毒的檢測在大多數(shù)基質(zhì)中相當有限，而病毒基因組的檢測在整個研究期間是可能的。

然而，在較低的溫度下，病毒在飼料基質(zhì)上可以穩(wěn)定幾天甚至幾周，尤其是在甜菜和土豆上。青草、青貯草和青貯玉米在任何時間點都分離不到病毒。對該病毒在節(jié)肢動物體內(nèi)可檢出性的研究表明，根據(jù)溫度和攝食量的不同，該病毒通常在一定時間內(nèi)可檢出。在低溫條件下，穩(wěn)蠅的病毒檢出率超過了預(yù)期，超過168小時。飼喂試驗未導(dǎo)致豬感染。然而，這種概念驗證研究的力量是有限的。

總結(jié)

在過去幾年中，非洲豬瘟（ASF）已成為大流行，在歐盟內(nèi)部受影響的野豬種群是該流行病的主要驅(qū)動因素。這種情況帶來了新的挑戰(zhàn)，即需要對在受影響地區(qū)收獲的農(nóng)產(chǎn)品進行風險評估，這些農(nóng)產(chǎn)品有可能接觸受影響動物的尸體或體液。

為響應(yīng)“非洲豬瘟病毒在飼料、墊料和機械載體中的生存及其在病毒傳播中的潛在作用”（GP/EFSA/ALPHA/2021/09）的呼吁，該聯(lián)盟開始提供關(guān)于非洲豬瘟病毒（ASFV）在植物源性飼料和墊層材料中的穩(wěn)定性和滅活（存活）的可靠數(shù)據(jù)?？紤]到歐洲的生產(chǎn)參數(shù)，我們選擇了14種相關(guān)的飼料和墊料，即青草、青貯草、干草、樹皮、泥炭、木屑、青貯玉米、油菜籽、大麥、小麥、燕麥、秸稈、土豆和飼料用甜菜進行了詳細的穩(wěn)定性試驗。所有基質(zhì)都被ASFV人工污染，并在5種不同的環(huán)境條件（-20℃、4℃、10℃、20℃和37℃）下保存長達9個月。

在不同的時間點使用實時PCR進行病毒基因組檢測和易感原代和/或永久細胞上的進行病毒分離，評估重復(fù)樣本（至少在三次技術(shù)運行中測試的生物三重副本）。為了便于對病毒分離的評估，采用適應(yīng)細胞培養(yǎng)和/或熒光標記的ASFV毒株加入陰性豬血中進行篩選。對最近的德國ASFV毒株（來自受感染動物的血液）重復(fù)了關(guān)鍵時間點。通過在干草、秸稈和小麥上使用有機酸來降低風險的概念驗證完成了這些研究。

研究表明，在進行穩(wěn)定性測試時，方法是一個關(guān)鍵問題。盡管存在技術(shù)障礙，但使用原代細胞的現(xiàn)有系統(tǒng)提供了最敏感的結(jié)果，因此更可取。

病毒基因組的穩(wěn)定性被認為是非常高的，因此病毒基因組可以在很寬的溫度范圍和很長的時間內(nèi)檢測到也就不足為奇了。青貯、青草和干草的基因組檢測比較困難。這些問題只能通過適當?shù)奶崛》椒▉聿糠挚朔?。我們假設(shè)這些抑制作用仍然表明非常迅速的失活。

對于傳染性病毒的檢測情況則不同。盡管進行了多次嘗試，但這種傳染性病毒只能在少數(shù)樣品中檢測到，而且只能在較低的溫度下檢測到。令人驚訝的是，這種病毒經(jīng)常在甜菜和土豆中被檢測到。在這里，病毒在代表深秋的低溫下存活了幾周。

墊料也得到了類似的結(jié)果。病毒的檢測僅限于較低的儲存溫度和較短的時間。在4℃下，除一個樹皮樣品在28天后仍保持弱陽性外，通常在7天后發(fā)生失活。即使在10℃下，7天后也只有樹皮檢測到了一次。在實驗條件下，在中等溫度下保存總是適合于滅活病毒。用丙酸處理幾乎沒有額外的緩解效果，這與普遍較低的檢出率有關(guān)。

雖然公認只有鳥thodoros屬的軟蜱可以作為非洲豬瘟病毒（ASFV）的有效生物載體，即復(fù)制病毒并維持其在其階段，但其他吸血節(jié)肢動物作為機械載體的可能作用仍在討論中。特別是，在目前的非洲豬瘟流行中觀察到的季節(jié)性，在夏季的幾個月里，養(yǎng)豬場爆發(fā)的趨勢非常明顯，這提出了一個問題，即節(jié)肢動物媒介是否可以在疾病動力學中發(fā)揮作用，作為感染野豬種群和家豬之間或家豬場內(nèi)部和之間的橋梁。該研究聯(lián)盟旨在提供關(guān)于機械媒介在非洲豬瘟傳播中的作用的可靠數(shù)據(jù)。詳細研究了代表性節(jié)肢動物在食用感染性血液后攜帶感染性病毒的時間。為此，調(diào)查了白紋伊蚊和鈣紋伊蚊的實驗室菌落以及野外捕獲的虻。

文章內(nèi)容轉(zhuǎn)自Sandra Blome, 7, 2024, Pig Progress